? ? ? ? 首先我們要知道UHPLC 是什么，它的全稱(chēng)是超高效液相色譜（Ultra-High Performance Liquid Chromatography），是色譜分離科學(xué)中的一個(gè)全新類(lèi)別與新技術(shù)。在制造技術(shù)、擴(kuò)散體積和耐受壓力方面進(jìn)行了優(yōu)化，采用小顆粒的固相，增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量，最大限度的發(fā)揮色譜性能。
? ? ? ? 色譜儀器作為一種精密儀器，一些不正確的操作或者忽視的實(shí)驗(yàn)步驟，會(huì)導(dǎo)致儀器分析效果的不佳，甚至對(duì)儀器造成傷害。其中，最多出現(xiàn)的一些柱壓、漂移和峰型異常的問(wèn)題，比如鬼峰、肩峰、峰型不準(zhǔn)等。
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? ? ? ? 故障1：出現(xiàn)肩峰
? ? ? ? 可能是樣品濃度太高，有濃度超載的情況?？梢杂昧鲃?dòng)相配樣，總的樣品體積小于第一峰的15%。如果樣品溶劑過(guò)強(qiáng)則采用較弱的樣品溶劑。也可能是出現(xiàn)了色譜柱塌陷的問(wèn)題，如果出現(xiàn)了柱塌陷可以更換色譜柱或者打開(kāi)進(jìn)液端，用和柱填料相同的固定相修補(bǔ)。也可能是由于樣品中有一個(gè)和它極性非常接近的物質(zhì)，兩者沒(méi)辦反完全分離，所以就出現(xiàn)了肩峰的狀況。
? ? ? ? 故障2：出現(xiàn)鬼峰
? ? ? ? 對(duì)于等度色譜來(lái)說(shuō)，出現(xiàn)鬼峰的原因主要是回收流動(dòng)相、過(guò)載和沉淀、流路產(chǎn)生；對(duì)于梯度色譜，主要原因是溶液中有雜質(zhì)的情況以及樣品中含蛋白質(zhì)。很多情況下鬼峰的出現(xiàn)都是由于雜質(zhì)顆粒物、蛋白質(zhì)沉淀物和化學(xué)污染物引起的。在市場(chǎng)上有多款產(chǎn)品主要是針對(duì)固體顆粒物的攔截，但是對(duì)引起鬼峰出現(xiàn)的有機(jī)污染物卻不能起到攔截效果。恒譜生精心研發(fā)出一款鬼峰捕集小柱可以有效吸附去除系統(tǒng)中的極性較弱的雜質(zhì)，從而防止系統(tǒng)中的雜質(zhì)峰對(duì)目標(biāo)峰的干擾。其安裝在梯度混合器和進(jìn)樣器之間，不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì)，還可以有效的去除管路和混合器中的雜質(zhì)。
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? ? ? ? 故障3：出現(xiàn)峰拖尾
? ? ? ? 出現(xiàn)峰拖尾的現(xiàn)象情況有很多，比如樣品進(jìn)樣量過(guò)大，或者是樣品濃度太高導(dǎo)致柱超載，這時(shí)應(yīng)該降低樣品量，增加柱直徑采用較高容量的固定相。
? ? ? ? 也可能是死體積或柱外體積過(guò)大，色譜柱柱效下降、柱頭塌陷等情況，可以更換合適的色譜柱，或者在色譜柱前加一個(gè)保護(hù)柱。恒譜生分析/制備保護(hù)柱可以起到截留導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞、柱頭塌陷和柱效下降的化學(xué)物質(zhì)和顆粒物。樣品和流動(dòng)相的過(guò)濾可以維護(hù)保護(hù)柱對(duì)化學(xué)污染物的吸附容量，能夠更長(zhǎng)時(shí)間的維護(hù)柱效。
發(fā)布于: 2021-05-28