? ? ? ? 誤區(qū)1：HPLC 柱不可以反沖
? ? ? ? 這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設(shè)計(jì)的耐壓值是遠(yuǎn)高于最大操作壓力的。換柱時(shí)反沖可以清洗柱頭一些具有強(qiáng)吸附性質(zhì)的物質(zhì)，我們沖洗出這些殘留物質(zhì)也是為了防止壓力增大。但是如果你購(gòu)買(mǎi)的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料，這時(shí)你反沖會(huì)沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。
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? ? ? ? 誤區(qū)2：所有的C18（L1）色譜柱都是一樣的
? ? ? ? 這是不正確的。在早期的HPLC體系中，C18是唯一反向色譜的鍵合固定相，因此C18就作為了反向色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。但是時(shí)代不會(huì)一直停滯腳步，人們對(duì)于科學(xué)的追求與理解愈發(fā)深刻，更多的固定相出現(xiàn)了，誕生了許多C18色譜柱。雖然同樣是選用硅膠作為基體，但各自都有自己特定的填料鍵合合成工藝，因此色譜性能也不相同。所以單純的因?yàn)槊Q(chēng)都是C18色譜柱，想當(dāng)然覺(jué)得性能都一樣是不對(duì)的。
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? ? ? ? 誤區(qū)3：色譜柱里一旦進(jìn)入空氣就會(huì)損壞
? ? ? ? 我們都知道當(dāng)色譜柱不與色譜儀連接的時(shí)候，需確保色譜柱被緊緊地密封。但是在實(shí)際應(yīng)用中，即使色譜柱的端部進(jìn)入了少量的空氣也不是很?chē)?yán)重的事情。當(dāng)色譜柱連接到色譜儀上使用時(shí)，在系統(tǒng)初始加壓階段，在很短的時(shí)間內(nèi)空氣就會(huì)被溶劑擠壓排出。所以，不要因?yàn)樯V柱進(jìn)入了少量空氣就認(rèn)為色譜柱已被損壞。
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? ? ? ? 誤區(qū)4：保護(hù)柱是沒(méi)必要的
? ? ? ? 這也是太絕對(duì)的誤區(qū)，其實(shí)使用保護(hù)柱有很多好處。HPLC的移動(dòng)相中常使用各種試劑，其中會(huì)混有一些不溶解物質(zhì)或不純物質(zhì)。多數(shù)不溶物通過(guò)使用篩板或膜濾器過(guò)濾移動(dòng)相可以除去，但極細(xì)小的粒子還是無(wú)法完全過(guò)濾。此外在移動(dòng)相調(diào)制之后，還有通過(guò)空氣、容器、人體等有不溶物、不純物落入的可能性。這些不溶物、不純物質(zhì)會(huì)污染柱、或使堵塞、或給分析帶來(lái)不良影響等。這時(shí)通過(guò)在色譜柱前安裝分析保護(hù)柱可以防止其產(chǎn)生，能起保護(hù)色譜柱的作用。相較于更換一根昂貴的分析柱，添加或更換保護(hù)柱只需要很少的花費(fèi)。恒譜生液相色譜保護(hù)柱幾乎無(wú)死體積、便于更換，適用于UHPLC系統(tǒng)的高壓，將那些強(qiáng)保留的、不可吸附的化合物截留下來(lái)。樣品和流動(dòng)相的過(guò)濾可以維護(hù)保護(hù)柱對(duì)化學(xué)污染物的吸附容量，能夠更長(zhǎng)時(shí)間的維護(hù)柱效，延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。
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? ? ? ? 誤區(qū)5：反相色譜柱不可以使用純水相
? ? ? ? 這也是不正確的，有些色譜工作者在使用低有機(jī)溶劑含量或者純水作為反相色譜柱的流動(dòng)相時(shí)，發(fā)生相塌陷的現(xiàn)象，所以有些人認(rèn)為反相色譜柱不可以使用純水相。但事實(shí)上市場(chǎng)上銷(xiāo)售的反相色譜柱（如極性嵌入和極性封端柱）都是具有水浸潤(rùn)性的，其表面特性是允許使用純水的，不會(huì)導(dǎo)致塌陷或者保留時(shí)間移位。
? ? ? ? 誤區(qū)6：色譜柱填料粒徑越小、壓力越高，分離效果越好
色譜柱性能的好壞不能單純用填料是否是超小的粒徑以及超高的柱壓來(lái)評(píng)估?，F(xiàn)代對(duì)于色譜柱的柱特性研究越來(lái)越深入，已經(jīng)研發(fā)了一些能夠提高色譜柱柱效的方法。例如，采用新的表面多孔材料的色譜柱，其柱效與sub-2μm UHPLC柱效一樣好，與常規(guī)的LC填料色譜柱比起來(lái)，柱壓很低。
誤區(qū)7：柱壓不會(huì)影響色譜分離效果
? ? ? ? 近年來(lái)，柱壓的問(wèn)題引起了很多色譜工作者的注意，柱壓是色譜的很多參數(shù)都是受柱壓影響的，包括部分溶質(zhì)的摩爾體積、停滯體積、柱孔隙度、保留因子、流動(dòng)相密度、介電常數(shù)、固定相結(jié)構(gòu)、pH值和電離常數(shù)等。當(dāng)色譜柱在約2000psi（13.789MPa）壓力下運(yùn)行時(shí)，即使保留時(shí)間上存在小差異，也并不會(huì)引起我們的注意；特別是如果重復(fù)性較好及定量不受影響的時(shí)候。但是，當(dāng)柱壓接近2000psi（13.789MPa）時(shí)，柱壓的影響可能就相當(dāng)明顯了。
? ? ? ? 近幾十年來(lái)，液相色譜法被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域，藥物分析，食品分析，環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域，人們對(duì)于液相色譜法的不斷研究，也誕生出更多的液相色譜應(yīng)用以及解決方法等，相信未來(lái)液相色譜法的應(yīng)用領(lǐng)域會(huì)更加廣闊。
發(fā)布于: 2021-03-19