C18 色譜柱是液相色譜中常用的固定相之一,為了確保其性能和壽命,需要進行適當的活化。以下是 C18 色譜柱活化的一般步驟:
1. 清洗:使用 HPLC 級別的溶劑清洗色譜柱,通常是先用甲醇或乙腈沖洗,再用色譜柱說明書中指定的溶劑沖洗。沖洗時,流速應適當,不宜過快或過慢,一般為正常分析流速的 2-3 倍。
2. 平衡:將清洗后的色譜柱與液相系統(tǒng)連接,使用流動相平衡色譜柱。平衡時間一般為 30 分鐘到 1 小時,直到基線穩(wěn)定。
3. 逐漸升高溫度:在平衡過程中,逐漸升高色譜柱的溫度,通常從室溫升高到 40-60℃,并保持一段時間,以激活固定相。
4. 沖洗:活化完成后,使用流動相再次沖洗色譜柱,以去除固定相表面的殘留物和激活劑。沖洗時間一般為 30 分鐘到 1 小時。
需要注意的是,不同品牌和型號的色譜柱活化方法可能會有所不同,因此在進行活化前,請仔細閱讀相關的說明書或咨詢廠家技術支持。此外,在活化過程中,應避免流動相的氣泡和雜質的進入,以保證色譜柱的性能和壽命。
發(fā)布于: 2023-08-26